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牛乳中乳糖含量測(cè)定

更新時(shí)間:2021-06-22      點(diǎn)擊次數(shù):18472

乳制品牛乳中乳糖含量測(cè)定分析

1. 介紹

乳糖是兒童生長(zhǎng)發(fā)育的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一,對(duì)青少年智力發(fā)育十分重要,特別是新生嬰兒*的,在自然界中只有哺乳類動(dòng)物的奶中含有乳糖,各類植物性食物中是不含乳糖的。一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促進(jìn)腦苷脂類和黏多糖類的生成,因而對(duì)幼兒智力發(fā)育非常重要。乳制品企業(yè)通常通過測(cè)定牛乳中半乳糖的含量來計(jì)算牛乳中乳糖的含量。

 

2. 實(shí)驗(yàn)

設(shè)備:

ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測(cè)器

Agilent 1260 HPLC,C.01.07

試劑及耗材:

流動(dòng)相A:超純水

流動(dòng)相B:色譜純乙腈

色譜柱:Beksich糖柱,4.6*250mm,5um

(貨號(hào):Bek445101

溫箱溫度:

30C

樣品:

牛乳樣品提取物

樣品預(yù)處理: 

樣品經(jīng)蛋白沉淀后,0.45um濾膜過濾后取上清液待上樣

進(jìn)樣體積:

20ul

按78%乙腈22%梯度比例進(jìn)行檢測(cè),運(yùn)行時(shí)間為20min

流動(dòng)相流速:

0.9ml/min

 

樣品檢測(cè):

樣品配置好后置于自動(dòng)進(jìn)樣器中,使用編輯好的方法進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣分析

3. 結(jié)果

 ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測(cè)器測(cè)定牛乳乳糖含量

結(jié)果見表1。

 1:乳糖定量檢測(cè),*個(gè)峰為半乳糖

 

表2:半乳糖葡萄糖分離度拖尾因子情況

 

 3:半乳糖定量曲線

 

 R=0.99903

本次實(shí)驗(yàn)的難點(diǎn)是樣品沒有紫外吸收,樣品水溶性強(qiáng),需用乙腈稀釋,半乳糖和葡萄糖不易達(dá)到基線分離。且ELSD3300運(yùn)行參數(shù)如氣體流速和檢測(cè)溫度以及增益值必須優(yōu)化。

 

4. 結(jié)論

本方法使用ELSD3300測(cè)定了牛乳中半乳糖的含量,半乳糖和葡萄糖實(shí)現(xiàn)了基線分離,ELSD3300有平衡時(shí)間短,基線噪音小,重現(xiàn)性高和線性好等特點(diǎn)。

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